植酸酶测定试剂盒
产品名称: 植酸酶测定试剂盒
英文名称: Phytase Assay Kit
产品编号: BC3140
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-11-22T10:39
使用范围: null
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植酸酶测定试剂盒产品内容:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
缓冲液:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存,临用前加缓冲液10mL配制,现用现配。
试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体24mL×1瓶,4℃保存。
显色剂:粉剂×6瓶,4℃保存,临用前根据用量每瓶加1mL双蒸水溶解,再加4mL试剂三混匀。
产品说明:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。
植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅,超声溶解器,回旋式振荡器。
植酸酶测定试剂盒操作步骤:
一、样本处理
1. 酶制剂:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:500~1000的比例(建议称取约0.001g,加入1mL提取液)加入提取液,在超声波溶解器上溶解15min,再用回旋式振荡器振荡15min,待测。
2. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,在超声波溶解器上溶解15min,再用回旋式振荡器振荡15min,4℃,4000g离心10min,取上清待测。
3. 饲料样品:饲料烘干粉碎,过40目筛,按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,在超声波溶解器上溶解15min,再用回旋式振荡器振荡15min,4℃,4000g离心10min,取上清待测。
4. 培养液等液体样品,混匀直接测定。
二、测定操作表
对照管
测定管
样本(μL)
100
100
37℃温育5min
试剂一(μL)
400
试剂二(μL)
500
37℃温育30min
试剂一(μL)
400
试剂二(μL)
500
显色剂(μL)
500
500
室温静置10min,4000rpm,4℃,离心10min,取上清1mL,缓冲液调零测定700nm处吸光值,△A=A测定管-A对照管
三、酶活性计算公式
标准曲线:y = 0.1084x + 0.0236,R2 = 0.9998
1. 按照蛋白浓度计算
酶活性定义:在37℃,pH5.5的条件下,每毫克蛋白每分钟从5mmol/L的植酸钠溶液中释放出1μmol的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/min/mg prot)=(△A-0.0236TUNEology 波长可调检测卡盒-->