基因定点突变试剂盒
产品名称： 基因定点突变试剂盒
英文名称： Site-directed Mutagenesis Kit
产品编号： T1900
产品价格： 0
产品产地： 北京
品牌商标： solarbio
更新时间： 2024-11-22T10:39
使用范围： null
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基因定点突变试剂盒基因定点突变试剂盒产品说明：
本试剂盒采用反向 PCR（Inverse PCR）技术，对含有目标基因的双链环状质粒进行扩增，直接 导入突变序列，从而实现单个或多个邻近碱基的突变（mutation）、缺失（deletion）、或插入（insertion）。 该技术的原理如图所示。首先以甲基化的质粒 DNA 为模板，使用人工合成含有目的突变碱基的引 物进行扩增反应，然后用 DpnI 限制性内切酶消化不含突变的质粒模板，再进行转化和筛选。
本试剂盒使用的 Mut Enzyme 及其配套 buffer 能够最大限度地保持扩增质粒的保真性，对引物 设计的要求相对宽松、灵活，最多可实现 21 个连续碱基的插入或删除。该方法操作简单快捷，突 变阳性率高，严格按说明书操作，6 个以下连续碱基的突变率可达 90%以上。
本试剂盒适用于≤6 kb 质粒的点突变。对于 6 kb 以上的质粒，推荐使用我公司的超长基因定点 突变试剂盒（CAT：T1910）。对于非甲基化的质粒（例如从大肠杆菌 JM110 或 SCS110 菌株中提取 的质粒），可通过转化 dam＋的大肠杆菌菌株（如 DH5α、TOP10、JM109、XL1-Blue 等），再抽提获 得甲基化的质粒作为 PCR 反应模板。
本试剂盒提供一个 4.5 kb、含有突变的 lacZ 基因的对照质粒（Control Plasmid）。质粒转化大肠 杆菌后在含 Amp、IPTG 和 X-gal 的琼脂平板上呈白色菌落；采用试剂盒提供的 Control Primers 成功 进行突变反应后，菌落呈现蓝色，可据此检测突变效率。